現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)方法較多但特異性均差。膽道閉鎖時(shí)，血清總膽紅素增高。堿性磷酸酶的異常高值對(duì)診斷有參考價(jià)值。Υ-谷氨酰轉(zhuǎn)酶高峰值高于300IU/L呈持續(xù)性高水平或迅速增高狀態(tài)。5′核苷酸酶在膽管增生越顯著時(shí)水平越高，測(cè)定值>25IU/L，紅細(xì)胞過(guò)氧化氫溶血試驗(yàn)方法較為復(fù)雜，若溶血在80%以上者則屬陽(yáng)性。
1.血清膽紅素的動(dòng)態(tài)觀察
每周測(cè)定血清膽紅素，如膽紅素量曲線隨病程趨向下降，則可能是肝炎；若持續(xù)上升，提示為膽道閉鎖，但重型肝炎并伴有肝外膽道阻塞時(shí)，亦可表現(xiàn)為持續(xù)上升，此時(shí)則鑒別困難。
2.超聲顯象檢查
若未見膽囊或見有小膽囊（1.5cm以下）則疑為膽道閉鎖。若見有正常膽囊存在，則支持肝炎，如能看出肝內(nèi)膽管的分布形態(tài)，則更能幫助診斷。
3.99mTe-diethyliminodiaceticacid（DIDA）排泄試驗(yàn)
近年已取代131碘標(biāo)記玫瑰紅排泄試驗(yàn)有較高的肝細(xì)胞提取率，優(yōu)于其他物品。可診斷由于結(jié)構(gòu)異常所致的膽道部分性梗阻，如膽總管囊腫或肝外膽管膽道造影狹窄，發(fā)生完全梗阻時(shí)，則掃描不見腸道顯影，可作為重癥肝內(nèi)膽汁郁積的鑒別。在膽道閉鎖早期，肝細(xì)胞功能良好，5分鐘顯現(xiàn)肝影，但以后未見膽道顯影，甚至24小時(shí)后亦未見腸道顯影，當(dāng)新生兒肝炎時(shí)，雖然肝細(xì)胞功能較差，但肝外膽道通暢因而腸道顯影。
4.脂蛋白-X（Lp-x）定量測(cè)定
脂蛋白-X是一種低密度脂蛋白，在膽道梗阻時(shí)升高。據(jù)研究，所有膽道閉鎖病例均顯升高，且在日齡很小時(shí)已呈陽(yáng)性。新生兒肝炎病例早期呈陰性，但隨日齡增長(zhǎng)也可轉(zhuǎn)為陽(yáng)性。若出生已超過(guò)4周而Lp-X陰性，可除外膽道閉鎖，如>500mg/dl，則膽道閉鎖可能性大。亦可服用消膽胺，比較用藥前后的指標(biāo)，如含量下降則支持新生兒肝炎綜合征的診斷，若繼續(xù)上升則有膽道閉鎖可能。
5.膽汁酸定量測(cè)定
最近應(yīng)用于血紙片血清總膽汁酸定量法，膽道閉鎖時(shí)血清總膽汁酸為107-294μmol/L，一般認(rèn)為達(dá)100μmol/L都屬郁膽。同年齡無(wú)黃疸，對(duì)照組僅為5-33μmol/L，平均為18μmol/L，故有診斷價(jià)值。尿內(nèi)膽汁酸亦為早期篩選手段，膽道閉鎖時(shí)尿總膽汁酸平均為19.93±7.53μmol/L，而對(duì)照組為1.60±0.16μmol/L，較正常兒大10倍。
6.膽道造影檢查
ERCP已應(yīng)用于早期鑒別診斷，造影發(fā)現(xiàn)膽道閉鎖有以下情況：①僅胰管顯影；②有時(shí)可發(fā)現(xiàn)胰膽管合流異常，胰管與膽管均能顯影，但肝內(nèi)膽管不顯影，提示肝內(nèi)型閉鎖。新生兒肝炎綜合征有下列征象：①胰膽管均顯影正常；②膽總管顯影，但較細(xì)。
7.肝穿刺病理組織學(xué)檢查
一般主張作肝穿刺活檢或經(jīng)皮肝穿刺造影及活檢。新生兒肝炎的特征是小葉結(jié)構(gòu)排列不整齊、肝細(xì)胞壞死、巨細(xì)胞性變和門脈炎癥。膽道閉鎖的主要表現(xiàn)為膽小管明顯增生和膽汁栓塞、門脈區(qū)域周圍纖維化，但有的標(biāo)本亦可見到多核巨細(xì)胞。因此，肝、膽穿刺肝活檢有時(shí)能發(fā)生診斷困難甚至錯(cuò)誤。
